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液相色譜儀的操作主要分5個(gè)步驟

更新時(shí)間:2023-02-14        閱讀:4435
  液相色譜儀根據(jù)固定相是液體或是固體,又分為液-液色譜(LLC)及液-固色譜(LSC)?,F(xiàn)代液相色譜儀由高壓輸液泵、進(jìn)樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測(cè)器、信號(hào)記錄系統(tǒng)等部分組成。與經(jīng)典液相柱色譜裝置比較,具有高效、快速、靈敏等特點(diǎn)。
 

 

  液相色譜儀的用途:
  1、在聚合物的分析中,吸附色譜一般用來(lái)分離添加劑,如偶氮染料、抗氧化劑、表面活性劑等,也可用于石油烴類(lèi)的組成分析。
  2、用于氨基酸、蛋白質(zhì)的分析,也適合于某些無(wú)機(jī)離子(NO3-、SO42-、Cl-等無(wú)機(jī)陰離子和Na+、Ca2+、Mg2+、K+等無(wú)機(jī)陽(yáng)離子)的分離和分析,具有十分重要的作用。
  3、適用于水溶液的體系,又適用于有機(jī)溶劑的體系。當(dāng)所用的洗脫劑為水溶液時(shí),稱(chēng)為凝膠過(guò)濾色譜,其在生物界的應(yīng)用比較多。
 
  液相色譜儀的操作步驟:
  1、準(zhǔn)備:
  ①準(zhǔn)備所需流動(dòng)相,用合適的0.45濾膜過(guò)濾,超聲脫氣20min;
 ?、诟鶕?jù)待測(cè)樣品的需要更換合適的色譜柱(注意方向)和定量環(huán);
  ③配制樣品的標(biāo)準(zhǔn)溶液,用合適的0.45um濾膜過(guò)濾;
 ?、軝z查儀器各部件是否連接正常,其中包括電源線(xiàn)、數(shù)據(jù)線(xiàn)、地線(xiàn)以及輸液管道。
 
  2、開(kāi)機(jī):
  ①接通電源,一次打開(kāi)檢測(cè)器、輸液泵,待檢測(cè)器自檢結(jié)束,顯示測(cè)量狀態(tài)時(shí)再打開(kāi)電腦、打印機(jī)及電腦顯示器等;
 ?、诟鼡Q流動(dòng)相并排氣泡;
 ?、蹖⒐苈返牟讳P鋼過(guò)濾頭放入裝有準(zhǔn)備好的流動(dòng)相儲(chǔ)液瓶中;
  ④逆時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)泵的排空閥,約半圈,之后擰松排空閥;
 ?、莅摧斔捅茫╬urge)鍵,綠燈亮?xí)r開(kāi)始以5.0ml/min流速?zèng)_洗約2分鐘,管路無(wú)氣泡時(shí)按下(stop)鍵,重新設(shè)定流速值。
 
  3、設(shè)計(jì)參數(shù):
 ?、倭魉僭O(shè)定
  ②波長(zhǎng)設(shè)定
 ?、墼O(shè)定完成按運(yùn)行(run)按鍵
  ④色譜工作站操作:依次執(zhí)行→打開(kāi)“在線(xiàn)工作站”→“通道1”→“OK”→“數(shù)據(jù)采集”后進(jìn)行零點(diǎn)校正、查看基線(xiàn),確定基線(xiàn)穩(wěn)定后關(guān)閉查看基線(xiàn)可以進(jìn)樣。
  進(jìn)樣后進(jìn)行采集、預(yù)覽、查看結(jié)果、打印
 
  4、進(jìn)樣:
 ?、龠M(jìn)樣前將(A/Z)檢測(cè)器按鍵調(diào)零查看基數(shù)是否在0mv,有偏差則(零點(diǎn)校正)按鍵進(jìn)行調(diào)試
 ?、谟脴悠非逑醋⑸淦鳌⑴懦龤馀?、抽取適量后將手動(dòng)進(jìn)樣閥桿調(diào)到位置,樣品注入進(jìn)樣閥后調(diào)到(Inject)位置,以此進(jìn)樣操作步驟完成,進(jìn)入在線(xiàn)工作站自動(dòng)采集數(shù)據(jù)流程。
 
  5、系統(tǒng)清洗:
  由于分析樣品時(shí)流動(dòng)相系統(tǒng)中含有緩沖鹽類(lèi)物質(zhì),需使用10%甲醇水溶液,以1.0ml/min沖洗40分鐘后更換甲醇試劑,以同樣1.0ml/min沖洗40分鐘,停泵,關(guān)機(jī)。

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