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你了解高效液相色譜分析柱嗎?知道其柱體使用材料嗎?

更新時間:2020-05-06        閱讀:2745
   高效液相色譜分析柱的分離效果取決于所選擇的固定相,以及色譜分析柱的制備和操作條件。
  色譜是一種分離分析手段,分離是核心,因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。對色譜柱的要求是柱效高、選擇性好,分析速度快等。市售的用于HPLC的各種微粒填料如多孔硅膠以及以硅膠為基質(zhì)的鍵合相、氧化鋁、有機聚合物微球、多孔碳等,其粒度一般為3,5,7,10μm等,柱效理論值可達5~16萬/米。對于一般的分析只需5000塔板數(shù)的柱效;對于同系物分析,只要500即可;對于較難分離物質(zhì)對則可采用高達2萬的柱子,因此一般10~30cm左右的柱長就能滿足復(fù)雜混合物分析的需要。

  色譜分析柱柱材料:
  該柱管常采用內(nèi)壁經(jīng)過精密加工拋光的不銹鋼管,以獲得高柱效。不銹鋼管耐溶劑、水和緩沖溶液的腐蝕,使用前色譜柱管先用Trichloromethane、甲醇和水依次清洗,再用50%的hno3對柱內(nèi)壁作鈍化處理。鈍化時使hno3在色譜柱管中至少滯留10min,以在柱內(nèi)壁形成鈍化的氧化物涂層。
  柱管也采用氟塑料、玻璃和玻璃襯里材料,主要是從抗腐蝕和易加工方面考慮。
 
  保證高效液相色譜分析柱的性能和壽命:
  1、認(rèn)證閱讀使用說明書
  2、使用填充良好的色譜分析柱。
  3、使用保護柱及在線過濾器。
  4、經(jīng)常以強溶劑沖洗色譜分析柱。
  5、色譜分析柱使用溫度*小于400C。
  6、盡量減少壓力波動,避免機械及熱沖擊。
  7、在水流動相與緩沖濃液中加200ppm的疊氮鈉。
  8、充分過濾樣品及流動相,盡量避免雜質(zhì)微粒與保強留分成。
  9、過夜或儲存時,沖洗掉鹽和緩沖液,用純有機溶劑流動相保存。
  10、硅膠基質(zhì)的的色譜分析柱,應(yīng)保持流動相的PH值范圍在3.0~8.0。
  11、流動相中含有緩沖溶液,應(yīng)注意應(yīng)95∶5的水及有機溶劑過渡,有機溶劑不能低于5%。

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