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高效液相色譜的日常維護注意事項

更新時間:2020-04-13        閱讀:3200
    高效液相色譜是目前應(yīng)用較多的色譜分析方法,高效液相色譜系統(tǒng)由流動相儲液體瓶、輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器和記錄器組成,其整體組成類似于氣相色譜,但是針對其流動相為液體的特點作出很多調(diào)整。HPLC的輸液泵要求輸液量恒定平穩(wěn);進樣系統(tǒng)要求進樣便利切換嚴密;由于液體流動相粘度遠遠高于氣體,為了減低柱壓高效液相色譜的色譜柱一般比較粗,長度也遠小于氣相色譜柱。

    和其它分析儀器一樣,你若想讓HPLC很好地為你工作、得到可靠的數(shù)據(jù),首先你要保養(yǎng)好它,使它處于一個良好的待機狀態(tài),這樣你操作它進行分析時就可以比較順利地獲得理想的結(jié)果。而且良好規(guī)范的操作習(xí)慣可以延長儀器使用壽命。HPLC日常操作注意事項:


1、選擇流動相時應(yīng)注意的幾個問題:

  • 盡量使用高純度試劑作流動相,防止微量雜質(zhì)長期累積損壞色譜柱和使檢測器噪聲增加。

  • 避免流動相與固定相發(fā)生作用而使柱效下降或損壞柱子。

  • 試樣在流動相中應(yīng)有適宜的溶解度,防止產(chǎn)生沉淀并在柱中沉積。

  • 流動相同時還應(yīng)滿足檢測器的要求。當使用紫外檢測器時,流動相不應(yīng)有較強的紫外吸收,一般檢測波長應(yīng)大于流動相的截止波長。

 

 

2、泵的維護保養(yǎng):

  •  防止任何固體微粒進入泵體,否則會磨損柱塞、密封環(huán)缸體和單向閥,因此應(yīng)預(yù)先對流動相進行過濾,可采用Millipore濾膜(0.22μm或 0.45μm )等過濾。泵的入口都應(yīng)該連接砂濾棒(或片), 輸液泵的濾器應(yīng)經(jīng)常更換。

  • 流動相不應(yīng)含有任何腐蝕性物質(zhì), 含有緩沖液的流動相不應(yīng)保留在泵內(nèi), 尤其是停泵過夜或更長時間。分析工作結(jié)束后必須用純水充分清洗后,再換成適合于色譜柱保存和有利于泵維護的溶劑(對于反相鍵合固定相,可以是甲醇或甲醇和水)

  • 泵工作時要留心防止溶劑瓶內(nèi)的流動相用完,否則空泵運轉(zhuǎn)也會磨損柱塞、密封環(huán)或缸體,終產(chǎn)生漏液。

  • 輸液泵的工作壓力不要超過規(guī)定的高壓力,否則會使高壓密封環(huán)變形,產(chǎn)生漏液。

 

3、紫外檢測器維護保養(yǎng):

  • 流通池進入氣泡會干擾基線,并極難排出,應(yīng)使用充分脫氣的流動相,以減少氣泡的產(chǎn)生。

  • 應(yīng)定期沖洗系統(tǒng),避免流通池干涸。

  • 檢測器中氘燈( 光源) 隨著使用時間的增加,氘燈強度降低,噪音會不斷增大,故分析前柱平衡得差不多時,再打開檢測器,分析工作結(jié)束及時關(guān)閉檢測器(頻繁開關(guān)檢測器也會縮短檢測器壽命,一般開啟間隔少于4小時,不建議關(guān)閉檢測器)。 

  • 塵埃在靜電的作用下容易覆蓋在光學(xué)元件上, 使光傳播效率降低,增加了光散射, 影響分析效果, 因此檢測器周圍的環(huán)境應(yīng)保持清潔。

     

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